Kỹ thuật nhuộm Gram - Viện nghiên cứu và đào tạo khoa học sức khỏe TPHCM

By Admin 29/03/2024 0

Mục tiêu

  1. Chuẩn bị được dung dịch nhuộm và cỗ công cụ nhằm tổ chức nhuộm
  2. Thực hiện tại được quá trình nhuộm Gram kể từ dịch phẩm.
  3. Phân biệt được chính vi trùng bắt color Gram dương và Gram âm.

1. Giới thiệu

Nhuộm Gram là 1 trong cách thức nhuộm vì thế Gram trí tuệ sáng tạo năm 1884. Phương pháp này canh ty phân biệt vi trùng bắt color Gram (Gram dương) và vi trùng ko bắt color Gram (Gram âm), kể từ cơ hỗ trợ cho việc chẩn đoán xác lập loại vi trùng.

Bạn đang xem: Kỹ thuật nhuộm Gram - Viện nghiên cứu và đào tạo khoa học sức khỏe TPHCM

2. Chuẩn bi dung dịch thử

  • Dung dịch tím gentian.
  • Dung dịch lugol.
  • Cồn tẩy 95°.
  • Dung dịch đỏ chót fucshin trộn loãng 1/10.

3. Kỹ thuật nhuộm

(1) Dàn dịch phẩm hoặc vi trùng lên bên trên lam kính sạch

(2) Cố lăm le bằng phương pháp hơ qua chuyện bên trên ngọn lửa đèn hễ. Để nguội

(3)  Nhuộm:

  • Phủ hỗn hợp tím gentian, nhằm khoảng chừng 30 giây. Rửa bên dưới vòi vĩnh nước chảy nhẹ nhàng.
  • Phủ hỗn hợp lugol nhằm cố định và thắt chặt color, nhằm khoảng chừng 30 giây. Rửa bên dưới vòi vĩnh nước.
  • Tẩy color vì thế hễ 95°, nhằm khoảng chừng 30 giây. Rửa nước.
  • Phủ hỗn hợp đỏ chót fucshin 1/10 của Gram, nhằm khoảng chừng 30 giây. Rửa bên dưới vòi vĩnh nước.

(4) Để thô bất ngờ.

(5) Soi bên dưới vật kính cầu.

Xem thêm: Bảng Chữ Cái Tiếng Việt Chuẩn Và Đầy đủ Mới Nhất - Review EDU

4. Nguyên tắc nhuộm

  • Nhuộm tím gentian: Nhuộm toàn bộ vi trùng trở nên color tím đen kịt.
  • Nhỏ lugol: Gắn color tím nhập vi trùng đậm hoặc nhạt nhẽo tuỳ loại.
  • Tẩy hễ 95°: Tẩy color một trong những vi trùng tuy nhiên hỗn hợp lugol ko gắn chắc chắn color tím nhập được. Không tẩy color một trong những vi trùng tuy nhiên color tím và đã được hỗn hợp lugol gắn chắc chắn nhập. Cách tẩy hễ đặc biệt cần thiết nên nên thiệt để ý nhập vượt lên trên trinh bạch nhuộm.
  • Nhuộm đỏ chót fucshin: Nhuộm đỏ chót quay về những vi trùng đã trở nên hễ tẩy color. Không có công dụng bên trên vi trùng đã trở nên nhuộm tím đen kịt.
Gram (+) Gram (-)

Nguyên lý nhuộm Gram

5. Cơ chế bắt color Gram

Có sự khác lạ thân mật vi trùng Gram (+) và vi trùng Gram (-) về cấu trúc của lớp peptidoglycan (murein) ở trở nên tế bào vi trùng.

  • Các vi trùng Gram (+) sở hữu lớp peptidoglycan dày rộng lớn thực hiện cho tới vi trùng lưu giữ chắc chắn color tím gentian và không xẩy ra tẩy color vì thế hễ. Sau khi nhuộm fucshin, vi trùng ko bắt red color vẫn không thay đổi color tím, này là vi trùng Gram (+).
  • Các vi trùng Gram (-) sở hữu lớp peptidoglycan mỏng mảnh rộng lớn thực hiện cho tới vi trùng ko tạo được color tím gentian và bị tẩy color vì thế hễ phát triển thành ko color. Khi nhuộm fucshin vi trùng bắt red color, này là vi trùng Gram (-).

6. Đọc kết quả

  • Vi trùng Gram (+) bắt color tím sẫm gentian: Tụ cầu, liên cầu, truất phế cầu, trực trùng bạch hầu, trực trùng than thở.
  • Vi trùng Gram (-) ko bắt color tím gentian nên sở hữu red color fucshin: Lậu cầu, óc tế bào cầu, E. Coli, Shigella, Salmonella, miêu tả.

7. Lưu ý về nguyên vẹn nhân nhuộm sai

Gram dương giả

Xem thêm: Những thuật ngữ tiếng anh khi đặt vé máy bay là gì? - BestPrice

  • Do tiêu xài bạn dạng được cố định và thắt chặt tự dưng thô, tiêu xài bạn dạng vượt lên trên dày.
  • Cặn dung dịch nhuộm (phải thanh lọc trước lúc dùng).
  • Đổ ko không còn lugol.
  • Tẩy hễ ko đầy đủ thời hạn.
  • Dung dịch fucshin vượt lên trên đậm hoặc nhuộm vượt lên trên lâu.

Gram âm giả

  • Do ko thay cho lugol
  • Tẩy hễ vượt lên trên lâu và tráng ko kỹ.

Bảng kiểm cho tới chuyên môn nhuộm gram

TT Các bước tổ chức kỹ thuật Y N
1. Chuẩn bị dung dịch nhuộm: tím gentian, lugol, hễ 95°, đỏ chót fucshin trộn loãng 1/10.

Dụng cụ: thực hiện kính, đèn hễ, diêm, cây bút viết lách lam, tăm bông, nước muối hạt tâm sinh lý, vòi vĩnh nước chảy nhẹ nhàng, bình đựng hóa học thải vứt, đồng hồ thời trang bấm giây.
2. Đánh dấm lam kính: viết số dịch phấm hoặc ký hiệu dịch phẩm nhập mặt mũi góc, mặt mũi ngược lam nhuộm.
3 Dàn dịch phẩm hoặc trùng lạc vi trùng lên bên trên lam kính sạch sẽ.
4. Cố lăm le dịch phẩm: bằng phương pháp hơ bên trên ngọn lửa đèn hễ, nhằm nguội.
5. Phủ hỗn hợp tím gentian, đế 30 giây. Rửa bên dưới vòi vĩnh nước chảy nhẹ nhàng.
6. Phủ hỗn hợp lugol nhằm cố định và thắt chặt color, nhằm 30 giây. Rửa bên dưới vòi vĩnh nước.
7. Tấy color vì thế hễ 95°, đế 30 giây. Rửa nước.
8. Phủ hỗn hợp Fucshin 1/10, nhằm 30 giây. Rửa bên dưới vòi vĩnh nước.
9. Để thô bất ngờ.
10. Soi bên dưới vật kính dầu( 100X).